甘肃地区宫颈HPV感染各亚型分布状况的研究

甘肃地区宫颈 HPV 感染各亚型分布状况的研究 【摘要】 目的:调查甘肃地区女性人乳头瘤病毒(hpv)感染状 况,为预防 hpv 感染和宫颈癌防治提供理论依据。方法:使用凯普 医用核酸分子快速导流杂交基因芯片技术(hybrimax),对 1766 例 甘肃兰州市兰州军区兰州总医院妇科门诊就诊的女性进行 hpv 亚型 检测。结果:甘肃地区高危型 hpv 感染总感染率为 16.99% (300/1766),其中主要致病的亚型 hpv16 的感染率为 33.00% (99/300),其次为 hpv58,占 20.33%(61/300),hpv52 感染率为 9.33%(28/300),hpv18 感染率 8.00%(24/300);低危型 hpv 检出 率为 3.17%(56/1766);单一感染 350 例,双重感染 40 例,多重感 染 6 例;其中中国人群常见型 40 例(hpv53、hpv 66、cp8304)。 结论:甘肃地区宫颈癌高发,高危型 hpv 感染可能为其发病的主要 因素,hpv 感染亚型分布有一定的区域性,该检测可用于宫颈癌的 筛查,以确定感染型别,有利于预测病变转归,指导临床治疗和随 访。 【关键词】 人乳头瘤病毒(hpv); 核酸分子快速导流杂交基因 芯片技术; 宫颈癌 中图分类号 r711.74 文献标识码 b 文章编号 1674-6805 (2013)10-0046-02 宫颈癌是发病率仅次于乳腺癌的女性常见恶性肿瘤,严重危害着 全球妇女的身体健康。而我国每年有 13.15 万新发宫颈癌病例,是 全球宫颈癌新发病例的重要发生国家[1]。我国的甘肃是该病的高 发地区,发病率居全国首位,据调查显示宫颈癌患病率在本地区为 502.56/10 万,死亡率为 11.88/10 万,占全癌的 11.67%。有报道 指出,宫颈癌的发生、发展的主要致病因素是人乳头瘤病毒(hpv) 感染所致[2],已知的 hpv 亚型多达 30 余种,因区域和种族的不同 也存在差异。随着科学的发展,基因芯片技术应用于 hpv 分型的检 测,效果值得肯定[3-5]。本试验采用凯普医用核酸分子快速导流 杂交基因芯片技术,对在甘肃省兰州市兰州军区兰州总医院妇科门 诊就诊的女性 hpv 感染情况进行研究分析。了解并掌握甘肃地区与 宫颈癌发病相关的主要 hpv 亚型的分布。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2010 年 5 月-2012 年 7 月在笔者所在医院妇科门诊就诊的女性患 者,共计 1766 例,年龄 19~80 岁,平均(40.22±8.93)岁,均 来源于甘肃省地区,所有患者均无其他内外科疾患,也无盆腔放疗、 化疗的病史。 1.2 仪器与试剂 仪器:涡旋振荡器(kp-xw80)常州中捷实验设备公司、pcr 扩增 仪(peapplied biosystems)eppendorf 产品、pcr 扩增管及管架 (0.2 ml)eppendorf 产品、医用核酸分子快速杂交仪 (hhm-2hybrimax 产品);试剂:hpv-dna 提取试剂盒(大连宝生物 技术有限公司)、hpv 基因微阵列分型检测试剂盒(深圳凯普生物技 术有限公司)。 1.3 标本 所有受检者均由同一位妇产科医生用宫颈刷置于宫颈口(鳞柱交 接处)沿顺时针旋转 3~5 周,获得移行区上皮细胞的样本,将采 集到的样本放入 3 ml 专用细胞保存液中,沿刷柄折痕处将宫颈刷 柄折断,旋紧管盖,做好标记,立即送检。 1.4 人类乳头瘤病毒(hpv)分型检测 应用 hpv 分型基因芯片检测试剂盒同时对 21 种 hpv 亚型,其中 高危型为:hpv16、hpv18、hpv31、hpv33、hpv35、hpv39、hpv45、 hpv51、hpv52、hpv56、hpv58、hpv59、hpv68;低危亚型为:hpv6、 hpv11、hpv42、hpv43、hpv44;我国患者常见亚型:cp8304、hpv53、 hpv66 进行检测。试剂盒购自深圳凯普生物技术有限公司提供,参 照试剂盒说明书进行操作。 2 结果 2.1 人乳头瘤病毒感染现状和亚型主要分布 396 例 hpv 感染的患者,其中 16.99%(300/1766)的为高危型 hpv, 低危型 hpv 检出率为 3.17%(56/1766),中国人群常见型 40 例 (hpv53、hpv66、cp8304)。所有高危型 hpv 感染患者中,33.00% (99/300)的为主要致病亚型为 hpv16 所致,第二致病高危亚型为 hpv58、hpv52,分别占 20.33%(61/300)、9.33%(28/300),其次 为 hpv18 感染率 8.00%(24/300);低危型 hpv11 感染率为 50.00% (28/56),hpv6 感染率为 48.21%(27/56)。此外,还有少数患者 感染了 hpv35、hpv45、hpv56、hpv42 等亚型。hpv 基因感染患者有 单一感染,也存在包含多基因的混合感染。 2.2 hpv 单一感染和多重感染 1766 例患者中,其中 350 例为单一感染,占 19.82%(350/1766), 混合感染 46 例,占 2.60%(46/1766),2.27%(40/1766)的患者为 双重感染,0.34%(6/1766)的患者为多重感染。混合感染多为 hpv16 合并其它亚型的感染。 3 讨论 hpv 是一类特异感染人皮肤、黏膜的共价双链环状 dna 病毒,在 于人类的长期相互作用中,病毒基因与人类基因相互整合,出现了 变异的多重基因型。根据 hpv 致病力的不同,可以将病毒分为低危 型和高危型,其中低危型病毒有 hpv6、hpv11、hpv42、hpv43、hpv44 等型别,常容易引发皮肤黏膜、生殖道乳头状瘤、外生性湿疣类病 变、低度子宫颈上皮内瘤变(cin)等良性增生性疾病,通常情况 下不发生恶性变化;相反,高危型病毒与宫颈癌及宫颈上

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